簡要描述:
糖原磷酸化酶b(GPb)測試盒)是糖原分解代謝的關鍵酶,使糖原分子從非還原端逐個斷開α-1,4-糖苷鍵移去葡萄糖基,釋放1-磷酸葡萄糖,直至臨近糖原分子α-1,6-糖苷鍵分支點前4個葡萄糖基處。GP分為有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和無活性的糖原磷酸化酶b(GPb)兩種形式。
更新時間:2024-09-02;廠商性質:經銷商;覽量:1106
糖原磷酸化酶b(GPb)測試盒
商品詳情:
測定意義:
糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP,EC 2.4.1.1))是糖原分解代謝的關鍵酶,使糖原分子從非還原端逐個斷開α-1,4-糖苷鍵移去葡萄糖基,釋放1-磷酸葡萄糖,直至臨近糖原分子α-1,6-糖苷鍵分支點前4個葡萄糖基處。GP分為有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和無活性的糖原磷酸化酶b(GPb)兩種形式。GPb在一定濃度的腺苷酸(5,-AMP)存在下可被激活。
貨號 | 規格 | 檢測方法 |
YSH3411 | 100管/48樣 | 微量法 |
YSH3411-1 | 50管/24樣 | 紫外分光光度法 |
測定原理:
GP催化糖原和無機磷產生葡萄糖殘基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶進一步依次催化NADP還原生成NADPH,在340nm下測定NADPH上升速率,即可反映GP活性。添加一定濃度的腺苷酸(5,-AMP)時測定GP(GPa和GPb)活性,未添加腺苷酸(5,-AMP)時測定GPa活性,GP活性-GPa活性得到GPb活性。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
樣品中AA提取:
1.按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行室溫勻漿,然后轉移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測。
2.細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
3.血清等液體:直接檢測。
計算公式如下:
1、血清(漿)LAP活力的計算:
單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA
2、組織、細菌或細胞中LAP活力的計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算:
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按細菌或細胞密度計算:
單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA
V反總:反應體系總體積,2×10-4 L;ε:對硝基苯胺摩爾消光系數,9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,2 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;2000:細菌或細胞總數,2000萬。
Ⅱ類主要組織相容性復合體DQβ1ELISA試劑盒 MHCDQβ1免費代測試劑
Ⅰ類主要組織相容性復合體GELISA試劑盒 MHCG免費代測試劑
Ⅰ類主要組織相容性復合體EELISA試劑盒 MHCE免費代測試劑
Ⅰ類主要組織相容性復合體CELISA試劑盒 MHCC免費代測試劑
9kDa信號識別顆粒ELISA試劑盒 SRP9免費代測試劑
98kDa核孔蛋白ELISA試劑盒 NUP98免費代測試劑
93kDa核孔蛋白ELISA試劑盒 NUP93免費代測試劑
8-羥基鳥糖苷酶1ELISA試劑盒 OGG1免費代測試劑
88kDa核孔蛋白ELISA試劑盒 NUP88免費代測試劑
85kDa核孔蛋白ELISA試劑盒 NUP85免費代測試劑
7-脫氫還原酶ELISA試劑盒 DHCR7免費代測試劑
70kDa熱休克蛋白結合蛋白1ELISA試劑盒 HSPBP1免費代測試劑
70kDa熱休克蛋白9ELISA試劑盒 HSPA9免費代測試劑
70kDa熱休克蛋白4ELISA試劑盒 HSPA4免費代測試劑
70kDa熱休克蛋白1樣蛋白ELISA試劑盒 HSPA1L免費代測試劑
糖原磷酸化酶b(GPb)測試盒50管/24樣堿性磷酶(AKP/ALP)測試盒/分光光度法
100T/48S堿性磷酶(AKP/ALP)測試盒/微量法
150ml堿性磷酶(ALP/AKP)測試盒
50管/48樣堿性磷酶(ALP/AKP)測試盒/比色法
96T堿性磷酶(ALP/AKP)測試盒/微板法
48T堿性磷酶(ALP/AKP)測試盒/微板法
50管/24樣堿性木聚糖酶(BAX)測試盒/分光光度法
100管/48樣堿性木聚糖酶(BAX)測試盒/微量法
50管/48樣焦磷:果糖-6-磷-1-磷轉移酶(PFP)測試盒/分光光度法
注意事項:
1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標準品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內使用完畢。
2. 為保證實驗結果的準確性,需先取1-2個樣做預實驗,如果測定的吸光值過高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測定。
3. 與茚三酮反應在570nm處無吸收峰,因此,570nm處測定結果不含這兩種氨基酸的量。
4.檢出限為100μmol/L。