直接測定DNA合成是事實上,現(xiàn)在有一種新的檢測方法能避免這種情況的發(fā)生——EdU檢測。EdU (5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷)也是一種胸腺嘧啶核苷類似物,但其連有的炔羥基團在天然化合物中很少見,在細胞增殖時能夠插入正在復制的DNA分子中,基于EdU與染料的共軛反應可以進行快速的細胞增殖檢測分析,可以有效地檢測處于S期的細胞百分數(shù)。
BrdU 需要DNA 變性后才能與抗體結合,導致BrdU、Hoechst 染色彌散,邊緣模糊不清;
而EdU 邊緣清晰完整,檢測更靈敏、更準確EdU可以檢測新合成的DNA,而EU則可以檢測新合成的RNA。EU是一種尿嘧啶核苷類似物,能夠在RNA轉錄時期代替尿嘧啶( U )滲入正在合成的RNA分子,基于EU與Apollo?熒光染料的特異性反應進行RNA檢測。EU能夠在體內和體外水平檢測時間和空間上RNA合成的變化,能夠更方便地研究RNA轉錄位點,結合相關抗體標記能夠檢測與RNA有相互作用的蛋白。結合EdU和EU進行檢測新合成的DNA和新合成的RNA,可以深入開展細胞增殖、細胞周期、細胞毒性、DNA復制及修復、信號通路等方面的研究。