測定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
氨基磺酸鎳/Nickel sulfamateCP,98%1公斤國產(chǎn)/進(jìn)口
乙二胺四乙酸四鈉鹽/EDTA四鈉鹽/EDTA tetrasodium saltAR,99%,帶4水100克國產(chǎn)/進(jìn)口
丁二酸鈉/琥珀酸鈉/丁二酸二鈉/丁二酸二鈉鹽/琥珀酸二鈉鹽/Sodium succinate dibasicAR,99%250克國產(chǎn)/進(jìn)口
丁二酸銨/琥珀酸銨/丁二酸二銨/琥珀酸二銨/Ammonium succinateAR,97%100克國產(chǎn)/進(jìn)口
己二酸/1,6-己二酸/肥酸/Adipic acidAR,99.5%500克國產(chǎn)/進(jìn)口
壬二酸/杜鵑花酸/1,7-壬二酸/庚烷-1,7-二羥酸/王二酸/Azelaic acidAR,88%250克國產(chǎn)/進(jìn)口
內(nèi)消旋-2,3-二溴丁二酸/2,3-二溴丁二酸/二溴丁二酸/α,β-二溴代琥珀酸/meso-2,3-Dibromosuccinic高純,98%,100克進(jìn)分
丙二酸/胡蘿卜酸/甜菜酸/縮蘋果酸/甲烷二羧酸/丙烷二羧酸/Malonic acidCP,98%,100克國產(chǎn)/進(jìn)口
丙二酸鈉一水物/丙二酸鹽一水物/丙二酸二鈉鹽一水物/Sodium malonate monohydrateCP,99%25克國產(chǎn)/進(jìn)口
3-氯苯甲酸/間氯苯甲酸/3-Chlorobenzoic acidCP,99%25克國產(chǎn)/進(jìn)口
4-氯苯甲酸/對(duì)氯苯甲酸/PCBACP,98%,25克國產(chǎn)/進(jìn)口
4-氯-3,5-二硝基苯甲酸/4-C-3,5-DNBABR,99%25克國產(chǎn)/進(jìn)口
3,5-二硝基苯甲酸/3,5-二硝基安息香酸/DNBACP,99%,及25克國產(chǎn)/進(jìn)口
2,4-二羥基苯甲酸/雷瑣辛甲酸/間苯二酚甲酸/樹脂酚甲酸/β-雷鎖辛酸/對(duì)羥基水楊酸/BRACP,99%25克國產(chǎn)/進(jìn)口
3,4-二羥基苯甲酸/原兒茶酸/3,4-Dihydroxybenzoic acidCP,97%25克國產(chǎn)/進(jìn)口
3,4-二甲氧基苯甲酸/綠藜蘆酸/藜蘆酸/3,4-二甲氧基苯酸/3,4-Dimethoxybenzoic acidAR,98%100克國產(chǎn)/進(jìn)口
4-氟苯甲酸/對(duì)氟苯甲酸/4-Fluorobenzoic acidCP,99%10克國產(chǎn)/進(jìn)口
對(duì)羥基苯甲酸/4-羥基苯甲酸/對(duì)苯酚甲酸/p-Hydroxybenzoic acidCP,99%100克國產(chǎn)/進(jìn)口
磷酸三鈉/正磷酸鈉/十二水磷酸鈉/磷酸三鈉十二水合物/TSPAR,98%500克國產(chǎn)/進(jìn)口
無水磷酸三鈉/三堿式磷酸鈉/原磷酸三鈉/磷酸三鈉/磷酸鈉/Trisodium phosphateAR,98%,500克國產(chǎn)/進(jìn)口
2,2-聯(lián)喹啉-4,4-二羧酸鈉/4,4-二羧基-2,2-聯(lián)喹啉二鈉/2,2-聯(lián)喹啉-4,4-二甲酸二鈉/BCABR,98%5克國產(chǎn)/進(jìn)口