伊人伊人伊人-亚洲伊人久久一次-天堂伊人网-伊人国产在线观看-在线播放精品-在线播放国产一区

技術文章您現在的位置:首頁 > 技術文章 > 蛋白質新技術
蛋白質新技術
更新時間:2011-03-07   點擊次數:2958次

蛋白質新技術

        蛋白質這一新技術為科研人員深入了解活細胞中蛋白質組半衰期動力學開辟了新途徑。

  清除不必要或有害的蛋白質是細胞進行自身調控的重要途徑之一。在生物體中主要通過兩種機制來實現:一種是通過蛋白酶體降解蛋白質,而另一種則是以細胞生長的方式對細胞內的蛋白質進行稀釋。快速分裂的細胞例如細菌主要是依賴“稀釋”的方式,而終末分化的哺乳動物細胞則主要是通過蛋白質降解的途徑。“由于蛋白質的清除途徑通常取決于細胞的類型,科學家們常常忽略了降解和稀釋之間存在的平衡關系

  脈沖追蹤術和蛋白質合成抑制法來檢測蛋白質的降解速率。盡管脈沖追蹤術已被應用了數十年,然而由于這種方法需要使用放射性標記和蛋白特異性抗體,使其應用范圍受到很大的限制;而蛋白質合成抑制劑則有可能會擾亂細胞的功能

 在這篇文章中研究人員開發了一種檢測蛋白質半衰期的新技術,將其命名為“漂白追蹤”(bleach-chase)術。他們首先利用熒光YFP標簽標記目的蛋白,進而利用短暫的閃光脈沖使10-60%的熒光基因失去熒光(即所謂“漂白”),由于時間短暫因此不會對細胞造成影響。

 “漂白促使標記蛋白分為了兩種亞群:熒光蛋白和非熒光蛋白。而理論上漂白后細胞不會再合成新的非熒光蛋白,熒光的衰減則只可能是依賴于蛋白質清除,”Eden解釋說:“我們利用熒光時差顯微術對漂白細胞和非漂白細胞進行了觀測,通過比較兩種細胞中的熒光水平改變從而獲得了非熒光蛋白的動力學數據。”

 ‘漂白追蹤’術除了能準確定量蛋白質的半衰期,還能幫助科學家鑒別哪些蛋白發生了活性降解,哪些蛋白則隨細胞分裂而發生了稀釋,”Eden說:“我們在試驗中針對人類癌細胞中100種不同的蛋白質進行了降解和稀釋分析,發現在檢測時間段中48%的蛋白質出現了降解,10%的蛋白質發生了稀釋,而42%的蛋白則同時存在降解和稀釋。”

  在進一步的研究中,Eden等利用一種化療藥物對細胞施加壓力以減慢細胞的生長速率,觀測這一效應對于蛋白質清除的影響。研究人員觀察到盡管短半衰期蛋白質沒法發生變化,但長半衰期蛋白質則經過更長時間的稀釋在更大程度上被清除。當他們檢測以不同速率減慢細胞生長的其他壓力時,觀察到了相同的效應。“我們認為這是一種相當普遍的現象,”Eden說:“這一簡單原理幫助我們更深入地了解了對應不同壓力時蛋白質清除率變化。值得注意的是,研究結果表明細胞并沒有利用蛋白質降解來補償稀釋率的變化。
 “相比于常規的脈沖追蹤術完成這些試驗非常的簡單,并且可以更快速地生成結果。它使得科學家們能夠真正實現大規模蛋白質半衰期檢測,”Eden指出:“然而其存在的*缺點就是蛋白質必須首先進行熒光標記,這有可能會對細胞內的蛋白質清除產生影響,但我們已非常小心的利用脈沖追蹤對比試驗排除了這種可能性。”

相信隨著熒光標記蛋白庫日益廣泛地應用于越來越多的生物體,這項新技術也將顯示出更加廣泛的用途。

上一篇:SNPs檢測方法

下一篇:呋喃西林

返回列表>>
 

化工儀器網

推薦收藏該企業網站
主站蜘蛛池模板: 日韩欧美一区二区三区| av福利影院| 欧美亚洲综合在线| 亚洲国产成人精品女人久久久| 国产一区二区在线视频| 97久久精品午夜一区二区| 国产精品123| 亚洲清纯自偷自拍另类专区| 欧美成人国产| 亚洲欧美日韩精品| 久久国产一区二区| 午夜欧美视频| 国产精品一区二区国产| 黄色毛片免费看| 亚洲成人免费| 国产 欧美 在线| 一区二区不卡视频| 国产精品系列在线观看| 日韩一区二区三区免费| 精品一区二区三区四区在线| 国产欧美一区二区精品久久久| 国产片欧美片亚洲片久久综合| 国产精品亚洲综合一区| 亚洲视频在线免费播放| 激情午夜婷婷| 日韩1页| 最新国产精品视频免费看| 九一毛片| 国产va精品免费观看| 91久久精品国产免费一区| 黑人群性xxx| 在线观看黄a大片爽爽影院免费| 亚洲综合精品一区二区三区中文| 91视频中文字幕| 美女网站全黄| 国产精品久久久久久久久鸭| 天天色天天射天天操| 国产成人精品日本亚洲语音2| 久久国产综合精品欧美| 免费中文字幕一级毛片| 一区二区三区91|